PCR實驗室根據實驗步驟一般分為四個功能區,從前到后分別為試劑貯存和準備區、樣本制備區、樣本核酸擴增區、擴增產物分析區,每個功能區的作用均不同,所以在設計建設時也有不同的要求,下面就對PCR實驗室各功能區的作用及規劃建設要求作一個簡單說明。
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PCR實驗室功能區作用及規劃建設要求
一、試劑貯存和準備區
作用:貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。
規劃建設要求:試劑和用于樣品制作的原材料應該直接運送到該區域,不得經過其它區域,并且要在本區域制備所需的試劑。本區域對于氣流壓力的控制沒有嚴格要求。
二、樣本制備區
作用:樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及加入樣品至擴增反應管、測定DNA的合成。
規劃建設要求:本區域氣流壓力相對于領近區域為正壓,避免臨近區的氣溶膠污染,另外在加樣操作中可能會發生氣溶膠污染,所以實驗人員應避免在本區域內不必要的走動。
三、樣本核酸擴增區
作用:DNA擴增,DNA模板加入到主反應混合液制備反應混合液。
規劃建設要求:本區域氣流壓力相對于領近區域應為負壓,以避免氣溶膠從本區泄漏,同時實驗室人員要避免在本區域內不必要的走動。個別操作(如加樣)應在超凈臺內進行。
四、擴增產物分析區
作用:擴增片段的測定。
規劃建設要求:本區域是主要的擴增產物污染來源,因此本區域氣流壓力相對領近區域應為負壓,防止擴增產物的擴散。
綜上所述,PCR實驗室規劃建設要做好區域的劃分和潔凈通風系統的設計,高效結合各個獨立功能區,嚴格控制氣流壓力,對新風進行過濾,有效排除室內污染,控制實驗室的潔凈度,保證各功能區的空氣環境滿足要求。